细胞转染及转染试剂使用方法

 

 

我公司自主研发的LipoFiterTM转染试剂,具有转染效率高,重复性好,操作简单,无明显细胞毒性,抗血清干扰等优点,用LipoFiterTM 转染细胞后,对于大多数细胞,72小时内不更换培养液无明显细胞毒性。使用LipoFiterTM 转染时血清的存在不影响转染效率,这样可以减小去除血清对细胞的损伤。

实验准备:实验前一天铺板293T细胞,准备转染

 

操作步骤:1、观察前一天准备的细胞密度,达到70%-80%可转染

                2、吸去原有培养基,加入新鲜完全培养基,混匀,放置于37℃,待转染

                3、取2个EP管加入无血清培养基,一份加入溶解好的质粒,另一份加入LipoFiterTM,震荡混匀

                4、5min后将2个EP管种液体混合,吹匀静置20分钟

                5、20min后取出培养箱中的培养皿,加入混好的脂质体,混好后放入培养箱,37℃培养6h

                6、6h取出培养皿,吸去旧的培养基,加入完全培养基后,放入培养箱

                7、24h后取出培养基,荧光显微镜观察转染效果

   

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