慢病毒包装完成后如何用慢病毒感染目的细胞

 

 

慢病毒包装完成后如何用慢病毒感染目的细胞

 

 

实验准备:将状态良好的细胞接种到6孔板

 

 

实验步骤:

 

1、从培养箱中取出接种细胞的6孔板,吸去原有培养基,加入新鲜培养基和Polybrene(如有需要),混匀后放入培养箱,37℃孵育30min

2、30min后,取出,同时从冰箱中取出慢病毒,缓慢冰融

3、将病毒液按不同MOI加入细胞中,混匀,37℃培养12h

4、12h后吸去含病毒的培养液,换上新鲜培养液,37℃培养48h

5、带GFP的病毒,通过荧光显微镜观察表达效率;

6、带Puromycin的病毒,换上适当浓度的Puromycin的新鲜培养液筛选稳定转导的细胞株

 

 

注意事项:加病毒液时,尽量在冰上操作