自噬整体研究服务

自噬作为时下的研究热点,有非常深远的研究意义。汉恒生物经验丰富的自噬研究团队,可以为您提供自噬研究的整体服务,省时,节力,专业。

 

一、自噬病毒工具

 

汉恒生物有多种自噬病毒研究工具可以提供,便于直接感染目的细胞后直观地观察细胞自噬的整体水平;

 

1)GFP-LC3单荧光自噬指示病毒系统

 

      GFP-LC3病毒系统可高效感染目的细胞,表达GFP-LC3,感染感染后细胞可在荧光显微镜下实时观察自噬的整体水平;

 

      由于电镜耗时长,不利于监测(Monitoring)自噬形成。我们利用LC3在自噬形成过程中发生聚集的现象开发出了GFP-LC3指示技术:无自噬时,GFP-LC3融合蛋白弥散在胞浆中;自噬形成时,GFP-LC3融合蛋白转位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。汉恒生物已开发出高效的评价用GFP-LC3病毒载体,通过瞬时高效感染细胞,配合活细胞工作站成功评价自噬流。

 

2)mRFP-GFP-LC3双荧光自噬指示病毒系统

 

         汉恒生物科技(上海)有限公司已开发出用于表达mRFP-GFP-LC3 融合蛋白的病毒产品。mRFP 用于标记及追踪LC3,GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。 已多种双荧光病毒系统提供,具体如下:

 

       a)mRFP-GFP-LC3腺病毒系统——可高效感染目的细胞,表达mRFP-GFP-LC3,感染后细胞可在荧光显微镜下实时观察自噬发生过程;

 

       b)mRFP-GFP-LC3慢病毒系统——可以稳定表达持续检测细胞的自噬流检测;

 

      c)mRFP-GFP-LC3腺相关病毒(AAV)系统——最有效的在体自噬流检测工具;

 

 

除此之外,我们还提供参与自噬的常见基因的病毒现货Beclin1Atg7等满足您实验的需求,您可以点击查询您要研究的基因是否有现货——病毒现货查询系统

 

 

二、自噬检测以及整体服务

 

1)自噬检测服务

 

       常规自噬检测服务包括western blot检测细胞自噬的水平,优惠提供自噬常规抗体LC3、p62以及beclin1等,我们的研究团队长期为客户提供自噬技术服务,有丰富的自噬研究经验,我们的优势是周期短,质量高;

 

       a)利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价自噬形成。自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),因此,LC3-II/I比值的大小可估计自噬水平的高低。(Note:LC3抗体对LC3-II有更高的亲和力,会造成假阳性。方法2和3需结合使用,同时需考虑溶酶体活性的影响。)

 

       b)利用Western Blot检测p62蛋白来评价自噬以及自噬流的强弱:起初自噬所降解的底物被认为是随机的,但是后来的研究表明有些蛋白是seletively降解的,在这些蛋白之中研究的最为透彻的是蛋白p62, p62蛋白水平的多少与自噬流的强弱有着反比例关系)。

 

       c)汉恒生物课提供其他自噬相关蛋白的检测服务,详情请咨询汉恒技术工程师,免费咨询热线:400-092-0065!

 

2)LC3病毒感染服务

 

      凡购买本公司自噬病毒研究工具,我们承诺免费上门指导细胞病毒感染实验,以确保您的实验效果及安全性,此外我们还会提供腺病毒使用相关资料及文献供您参考;

 

3)自噬电镜服务

 

       电镜作为自噬检测的金指标,一直是高质量科研论文不可或缺的数据。客户提供样品,我们为其检测细胞或者组织的自噬以及自噬流的水平,并且辅助客户进行数据分析整理,详询汉恒自噬工程师;

      由于自噬体属于亚细胞结构,普通光镜下观察不到自噬体的形成,因此,直接观察自噬体需在透射电镜下。Phagophore的特征为:新月状或杯状,双层或多层膜,有包绕胞浆成分的趋势。自噬体(AV1)的特征为:双层或多层膜的液泡状结构,内含胞浆成分,如线粒体、内质网、核糖体等。自噬溶酶体(AV2)的特征为:单层膜,胞浆成分已降解。(autophagic vacuole,AV)

 

4)汉恒生物可提供自噬研究整体科研服务

 

        汉恒生物有长期关注自噬领域的技术支持以及实验操作员,我们可以为客户提供从课题设计到实验操作包括后续实验结果的整理等服务。具体请联系汉恒的客服代表,我们的技术工程师将与您做进一步详尽地沟通。免费咨询热线:400-092-0065

 

三、自噬研究相关试剂

 

 

汉恒生物可以根据您的实验需求为您提供最实用的试剂产品,让您用的放心,省心!

 

       产品

  厂商

 规格

溶酶体抑制剂Hydroxychloroquine

(羟氯喹)

Sigma

 1g

mTOR抑制剂rapamycin

Sigma

20mM

自噬抑制剂3-Methyladenine(3-MA)

Sigma

100mg

 

 参考文献

   1、TRB3 links insulin IGF to tumour promotion by interacting with p62 and impeding autophagic proteasomal degradations
     (2016年发表于Nature Communications,作者:胡卓伟)

 

 
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