自噬LC3双标腺病毒

 

自噬LC3双标腺病毒产品参数

   

产品编号
产品名称
产品规格
官方售价
HB-AP210 0001
Autophagy Indicator

1ml (10^10 PFU)

¥7200

 

 

线粒体自噬

 

线粒体自噬的研究是目前生物学领域的研究热点, 汉恒生物自主研发的线粒体特异性定位荧光探针(pHBmTur-Mito)可准确定位标记线粒体,结合汉恒独家推出的双荧光LC3细胞自噬腺病毒的使用,即可准确实时地追踪线粒体自噬的动态过程。

 

产品名称
功能介绍
pHBmTur-Mito
 
Mito线粒体定位

 

 

线粒体自噬(mitophagy)是指细胞通过自噬的机制选择性地清除线粒体的过程。选择性清除受损伤或功能不完整的线粒体对于整个线粒体网络的功能完整性和细胞生存来说十分关键。线粒体自噬的异常和很多疾病密切相关, 因此对于线粒体自噬的具体分子机制以及生理意义研究有很重要的生物学意义。

 

 

自噬简介

 

       细胞自噬(autophagy or autophagocytosis):又称为Ⅱ型细胞死亡,是细胞在自噬相关基因(autophagy related gene,Atg)的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程。


       比利时科学家Christian de Duve在上世纪50年代经过电镜察看到自噬体(autophagosome)构造,并且在 1963 年溶酶体国际会议上首先提出了“自噬”这种说法。因而Christian de Duve被公以为自噬研讨的鼻祖。Christian de Duve 也因发现溶酶体,于1974年取得诺贝尔奖。

 

   

目前根据发生过程分为三类:Macroautophagy,Microautophagy和Chaperone-mediated autophagy CMA)。

大自噬(Macroautophagy):即我们说的自噬(autophagy);

微自噬(Microautophagy):是指溶酶体主动、直接吞噬胞浆成分的一种方式;

分子伴侣介导的自噬 (Chaperone-mediated autophagy,CMA):一些分子伴侣,如hsp70,能帮助未折叠蛋白转位入溶酶体。通常说的自噬泛指Macroautophagy.

 

自噬的过程

 

1):细胞接受自噬诱导信号后,在胞浆的某处形成一个小的类似“脂质体”样的膜结构,然后不断扩张,被称为Phagophore。
2):Phagophore不断延伸,将胞浆中的任何成分,全部揽入,然后“收口”,成为密闭的球状的autophagosome,即“自噬体”。
3):自噬体形成后,可与细胞内吞的吞噬泡、吞饮泡和内体融合(这种情况不是必然要发生的)。
4):自噬体与溶酶体融合形成autolysosome,期间自噬体的内膜被溶酶体酶降解,2者的内容物合为一体,自噬体中的“货物”也被降解,产物(氨基酸、脂肪酸等)被输送到胞浆中供细胞重新利用,而残渣或被排出细胞外或滞留在胞浆中。

 

 

 

自噬的调控

 

1、依赖mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶点)途径的自噬

     1)PI3K-AKT-mTOR信号通路

     2)AMPK-TSC 1/2-mTOR 信号通路

2、其它的信号通路

     1)3-甲基腺嘌呤(3-MA)通过抑制Class Ⅲ PI3K的活性抑制自噬。

     2)beclin1和UVRAG作为正调控子,抗凋亡因子bcl-2作为负调控子共同参与组成Class Ⅲ PI3 复合物调控自噬。

     3)GTP结合的G蛋白亚基Gαi3抑制自噬;GDP结合的Gαi3蛋白活化自噬。

     4)死亡相关蛋白激酶(death-associated protein linase,DAPK)和DAPK相关蛋白激酶(DAPK-related protein kinase-1,DRP-1)诱导自噬。

     5)PKA、casein激酶 Ⅱ、MAP激酶、calcium途径也在自噬错综复杂的调控网格中,但其机制还不甚清楚。

 

 

 

 

自噬与疾病

 

1、自噬与代谢

     自噬能清除不正常构型的蛋白质,并消化受损和多余的细胞器,是真核细胞中广泛存在的降解/再循环系统。在细胞新陈代谢、结构重建、生长发育中起着重要作用。在饥饿和新生儿早期,自噬作用明显加强,自噬体显著增多。

 

2、自噬与肿瘤

     细胞自噬与肿瘤的关系十分复杂,目前尚未完全阐明。一方面,正常细胞自噬增强,可表现出抑制肿瘤发生的功能;与此相反,抑制细胞自噬有潜在的致瘤可能。另一方面,肿瘤细胞也可通过增强细胞自噬来对抗由缺氧、代谢产物、治疗药物诱导的应激反应。

  

 

汉恒自噬产品与服务

 

自噬抑制剂

 

1)3-Methyladenine(3-MA):(Class III PI3K) hVps34 抑制剂
2)Bafilomycin A1:质子泵抑制剂
3)Hydroxychloroquine(羟氯喹)

 

自噬相关抗体

 

1)A14292,Premo自噬TB/ GFP TR-FRET LC3B抗体试剂盒

2)Anti-MAP1A/LC3A/B 自噬微管相关蛋白轻链3抗体

3)Anti-MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3)  自噬微管相关蛋白轻链3抗体

4)兔抗人、大、小APG4B细胞自噬相关抗体\ Anti-APG4B/AUTL1

5)自噬微管相关蛋白轻链3抗体\ Anti-MAP1LC3A

6)Anti-SQSTM1 / p62 antibody

汉恒生物已开发并完善了多套自噬相关的研究体系和工具,并积累了丰富的自噬研究经验

 

 

汉恒独家推出双荧光LC3细胞自噬腺病毒 

 


                                                                       

                                                                                                                                双荧光指示体系:汉恒生物科技(上海)有限公司已开发出用于产品。

 

 

   

       mRFP 用于标记及追踪LC3,GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体,即由于GFP 荧光蛋白对酸性敏感,当自噬体与溶酶体融合后GFP 荧光发生淬灭,此时只能检测到红色荧光。

 

       我们在显微镜成像后红绿荧光merge后通过merge后出现的黄色斑点即只是自噬体.红色的斑点指示自噬溶酶体,通过不同颜色斑点的计数可以清晰的看出自噬流的强弱。

如下图:细胞转染mRFP-GFP-LC3病毒后给予氨基酸剥夺处理2小时后出现明显增强的自噬以及自噬流。

红色斑点是自噬溶酶体(mRFP),黄色斑点是自噬体(RFP+GFP). 通过不同颜色斑点的计数可以清晰看出自噬流的强弱,实时监测自噬发生过程,准确,清晰,直观!

 

参考文献

 

1、Histone deacetylase 4 selectively contributes to podocyte injury in diabetic nephropathy;
 
    (Kidney International , (9 April 2014) | doi:10.1038/ki.2014.111)
 
(2014年发表于Kidney International,2013年影响因子7.916,通讯作者E-mail: fanyi@sdu.edu.cn
 
2、MicroRNA-216b/Beclin 1 axis regulates autophagy and apoptosis in human Tenon's capsule fibroblasts upon hydroxycamptothecin exposure
 
 (Experimental Eye Research,DOI: 10.1016/j.exer.2014.03.008)
 
(2014年发表于Experimental Eye Research,2013年影响因子3.017,通讯作者E-mail:zhilanyuan@vip.sina.com  ybge@njmu.edu.cn )
 
3、Interleukin-1β induces autophagy by affecting calcium homeostasis and trypsinogen activation in pancreatic acinar cells;
 
 Int J Clin Exp Pathol, 2014; 7(7): 3620–3631.
 
(2013年发表于International Journal of Clinical & Experimental Pathology,2013年影响因子1.783,通讯作者E-mail: nc.ude.ummf@xqgnef ; nc.ude.ummf@cqoahz)

 

 

 
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