细胞增殖检测快人一步:CCK8原理与方法

 

经典的细胞增殖和毒理学试验过去常采用MTT法,但是这种方法耗时不省力。已经被一种新的方法:CCK-8法所取代。它弥补了MTT的缺陷,是MTT的升级版细胞计数试剂盒。

 

CCK-8的英文全称是Cell Counting Kit-8,也就是进行细胞计数的一个盒子。那它的用途也就大致可以猜到,和细胞增殖、细胞毒性相关的实验都可以。

 

CCK-8法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

 

下面就正式来了解一下它的优势、实验原理吧

 

 

一、CCK-8方法的优势

 

CCK-8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

 

 

 

优势

 

1、酚红和血清对CCK-8法的检测不会造成干扰;

2、本试剂盒细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。

 

 

二、实验原理

 

  • CCK-8细胞增殖检测试剂盒是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的快速灵敏度试剂盒。

  • WST-8属于MTT的升级产品,工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物(formazan)(图1-2) ,其颜色的深浅与存活细胞数目的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450 nm波长处测定OD值,可以间接反映活细胞的数量。


 

 

 

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看了这么多,是不是对CCK-8有了更进一步的了解了呢?

 

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