J HEPATOL:肝纤维化研究进展

 我国慢性肝病(包括慢性肝炎、脂肪肝和肝硬化等)患者人数超过4亿。终末期肝病(肝硬化和肝衰竭)和原发性肝癌是为我国肝脏移植的主要适应证。阻止或延缓慢性肝病向肝硬化、肝衰竭和肝癌的发展,可以从源头上减少对移植肝的需求。
  肝纤维化是各类慢性肝病进展至肝硬化、肝衰竭或肝癌的必经之路。肝纤维化是一种由各种病因引起的伤口愈合反应。据报道,中间丝蛋白家族成员巢蛋白(Nestin)在伤口愈合反应期间参与维持组织内稳态。然而,目前对巢蛋白在肝纤维化中所起的作用知之甚少。

   来自中山大学附属第三医院的研究人员在国际顶级期刊Journal of Hepatology(IF>20)发表了题为Targeting Nestin+ hepatic stellate cells ameliorates liver fibrosis by facilitating TβRI degradation的文章,探讨了巢蛋白在肝纤维化过程中的功能及其精确的调控网络。文中使用到的腺相关病毒来自汉恒生物。
 

研究方法

通过免疫染色和实时定量PCR检测纤维化/肝硬化样品中巢蛋白的表达。

通过萤光素酶报告基因检测研究了转化生长因子β(TGFβ)-Smad2/3信号转导诱导巢蛋白的表达。

通过检测巢蛋白干扰后促纤维化TGFβ-Smad2/3信号通路的活性和TGFβ受体I (TβRI)的降解,研究巢蛋白在肝星状细胞(HSCs)中的功能作用。

用干扰巢蛋白的腺相关病毒载体AAV6(汉恒生物)检测了在纤维化小鼠模型中下调巢蛋白的体内效果。

 

研究结果

巢蛋白主要在活化的肝星状细胞中表达,并随着肝纤维化的进展而增加。促纤维化途径TGFβ-Smad2/3直接诱导巢蛋白表达。Nestin可通过调控Caveolin1影响TβRI降解速率在促纤维化主要通路TGFβ-Smad2/3信号通路激活中发挥重要作用。在AAV6处理的小鼠纤维化模型中,下调巢蛋白可降低炎症浸润水平、肝细胞损伤和纤维化程度。

 

TGFβ诱导HSC中巢蛋白的表达,并与肝纤维化程度呈正相关。在体内和体外,巢蛋白的下调降低了TGFβ途径的活化,并减轻了肝纤维化。该研究首次揭示了Nestin在肝纤维化进程中的生理功能与调控网络,为肝纤维化防治提供了重要的理论依据。

 

研究分析

■为了确定Nestin是否与肝纤维化相关,作者使用了两个成熟的肝纤维化模型,CCl4和DDC模型,通过实验证明Nestin的表达在纤维化肝样本中比正常肝样本多,而Nestin的高表达与更严重的肝纤维化密切相关。详见图1。