CRISPR细胞基因编辑质粒与病毒

不同细胞类型对递送效率差异显著，正确选型是编辑成功的关键。我们提供质粒、慢病毒、腺病毒三种递送系统，同一系统可装载 KO/KI/点突变/dCas9 各类编辑元件，客户按细胞类型选型。

原理：利用 CRISPR-Cas9，由 sgRNA 引导 Cas9 核酸酶在目标基因特定位点切割 DNA 双链，细胞通过非同源末端连接（NHEJ）修复，随机引入插入/缺失（indel）导致阅读框移码，使目标基因功能永久性失活。

移码敲除：在外显子区域设计 sgRNA，切割后经 NHEJ 引入移码突变，使蛋白翻译提前终止，适用于大多数蛋白编码基因。

片段敲除：设计两个 sgRNA 靶向基因两端，切除中间大段序列，适用于功能结构域删除或长链非编码 RNA（lncRNA）敲除。

原理：将外源 DNA 片段（荧光蛋白、标签序列或功能基因）精准插入基因组特定位点。依托 CRISPR/Cas9 与同源定向修复（HDR）平台，通过含同源臂的 Donor 供体模板，在 Cas9 切割后由 HDR 机制将模板整合至切割位点。

原理：在目标基因特定位点引入单碱基替换，用于模拟人类疾病相关 SNP、研究蛋白功能位点或构建耐药突变模型。

CRISPR 介导点突变：Cas9 切割后通过 HDR 将含突变位点的单链 DNA（ssODN）供体整合至目标位点。

碱基编辑（Base Editor）：Cas9 切口酶与脱氨酶融合，不产生 DSB 直接催化 C→T 或 A→G 转换，效率更高、脱靶更低。

Prime Editor：pegRNA 引导逆转录酶在切口处合成新 DNA，可实现全部 12 种碱基替换及小片段插入/缺失，效率 30–80%。

单碱基转换（C·G↔T·A）优先碱基编辑；需任意类型替换、小片段插入/缺失或避免 DSB 时优先 Prime Editor。

原理：使用催化失活 Cas9（dCas9）融合效应域，在不改变 DNA 序列的前提下精准调控转录或表观遗传状态，可逆、无 DSB、脱靶风险低。