8835CRISPR 质粒产品
标准交付规格10
μg
质控测序 +
酶切鉴定
参考周期约 1–2 周
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汉恒生物依托成熟的 CRISPR/Cas 平台与自有病毒包装、质粒构建能力，提供体外细胞水平的「基因敲除—敲入—点突变—dCas9 调控」递送产品。根据您的细胞类型与研究目标，我们可灵活提供质粒、慢病毒、腺病毒三种形式的 CRISPR 产品，并匹配 NHEJ、HDR等最优技术路径，将编辑工具高效递送至靶细胞。
| 编辑方式 | 核心技术路径 | 可选递送产品 | 典型应用 |
|---|---|---|---|
| 基因敲除 | 移码敲除（NHEJ） 片段敲除（双 sgRNA） |
质粒 / 慢病毒 / 腺病毒 | 功能缺失研究、抗体验证、药物筛选 |
| 基因敲入 | CRISPR/HDR |
质粒 / 慢病毒 / 腺病毒 | 荧光/标签融合、报告基因插入、条件性敲入 |
| 基因点突变 | CRISPR/HDR |
质粒 / 慢病毒 / 腺病毒 | 疾病 SNP 模拟、蛋白位点研究、耐药模型 |
| dCas9 调控 | CRISPRi（KRAB 抑制） CRISPRa（VP64/p65 激活） 甲基化/去甲基化调控 |
质粒 / 慢病毒 / 腺病毒 | 可逆基因沉默/激活、表观调控、筛选 |
不同细胞类型对递送效率差异显著，正确选型是编辑成功的关键。我们提供质粒、慢病毒、腺病毒三种递送系统，同一系统可装载 KO/KI/点突变/dCas9 各类编辑元件，客户按细胞类型选型。
| 对比项 | 质粒 | 慢病毒 | 腺病毒 |
|---|---|---|---|
| 是否整合基因组 | 不整合（存在随机插入 CRISPR 切割位点的低概率风险） | 随机整合并稳定表达 | 不整合 |
| 表达丰度及速度 | 24 hr 开始表达 | 高水平表达，细胞水平 72 hr 达稳定 | 高水平表达，细胞水平 36 hr 达高峰 |
| 维持表达时间 | 3–7 天 | 稳定表达（可长期） | 体外约 1 周 |
| 滴度 | — | 10⁸–10⁹ TU/ml | 10¹¹ PFU/ml |
| 克隆容量 | 5–8 kb 外源片段 | ≤4 kb；插入片段增大滴度显著降低 | 高达 7 kb；插入片段增大滴度降低 |
| 适用细胞 | 细胞系适用；部分细胞转染效率低 | 适合，广谱；原代和悬浮细胞可用 | 适合，广谱，感染效率高；适合原代细胞 |
| 主要局限 | 难转染细胞效率低；Cas9 表达时间短，编辑窗口有限 | 随机整合，存在插入突变风险；Cas9 长期表达增加脱靶风险 | 高 MOI 可能产生细胞毒性；免疫原性较高 |
点击下方标签切换，查看四类基因编辑的原理与技术路径。
利用 CRISPR-Cas9，由 sgRNA 引导 Cas9 核酸酶在目标基因特定位点切割 DNA 双链，细胞通过非同源末端连接（NHEJ）修复，随机引入插入/缺失（indel）导致阅读框移码，使目标基因功能永久性失活。
在外显子区域设计 sgRNA，切割后经 NHEJ 引入移码突变，使蛋白翻译提前终止，适用于大多数编码基因。
设计两个 sgRNA 靶向片段两端，切除中间大段序列，适用于功能结构域删除或非编码 RNA敲除。
将外源 DNA 片段（荧光蛋白、标签序列或功能基因）精准插入基因组特定位点。依托 CRISPR/Cas9 与同源定向修复（HDR）平台，通过含同源臂的 Donor 供体模板，在 Cas9 切割后由 HDR 机制将模板整合至切割位点。
| 方案 | 效率 | 特点 | 适用 |
|---|---|---|---|
| CRISPR/HDR | 5–30% | 灵活，支持点突变与片段插入，需分裂活跃细胞 | 常规敲入、标签融合 |
在目标基因特定位点引入单碱基替换，用于模拟人类疾病相关 SNP、研究蛋白功能位点或构建耐药突变模型。
Cas9 切割后通过 HDR 将含突变位点的同源臂模版（Donor/ssODN）供体整合至目标位点。
使用催化失活 Cas9（dCas9）融合效应域，在不改变 DNA 序列的前提下精准调控转录或表观遗传状态，可逆、无 DSB、脱靶风险低。
| 类型 | 融合效应域 | 机制 | 应用 |
|---|---|---|---|
| dCas9 敲低（CRISPRi） | KRAB | 结合启动子阻断转录起始，可逆沉默基因 | 替代 shRNA/siRNA 的特异敲低、负向筛选 |
| dCas9 激活（CRISPRa） | VP64 / p65 | 招募转录机器激活内源基因表达 | 基因过表达表型、激活沉默基因、正向筛选 |
| 甲基化/去甲基化编辑 | DNMT3A / TET1 | 在特定位点加/去 DNA 甲基化，表观调控 | 表观遗传机制研究、可逆表达调控 |
从递送体系、编辑类型到技术路径、质控与支持，覆盖基因编辑项目落地的关键环节。
质粒 / 慢病毒 / 腺病毒按需选型，覆盖易转染细胞至原代、干细胞、iPSC 等难转染细胞类型。
KO / KI / 点突变 / dCas9 调控均可用三系统递送，一站式配齐编辑工具。
NHEJ / HDR按需匹配，兼顾效率与脱靶控制。
提供滴度、测序 / 酶切鉴定、内毒素 / 无菌（病毒）等质控与质量报告（CoA）。
原代 / 干细胞 / 难转染细胞可通过病毒产品覆盖，易转染细胞系用质粒降本提速。
提供 sgRNA 设计、转染 / 感染条件建议与编辑效率验证方法指导。
| 细胞类别 | 典型细胞 | 推荐递送产品 |
|---|---|---|
| 肿瘤/免疫细胞 | Jurkat, HepG2, HeLa, K562, NK-92 | 质粒 / 慢病毒 |
| 非癌永生化 | HEK293, HK-2, AC16, BEAS-2B | 质粒 / 慢病毒 |
| 干细胞 / iPSC | H1, H9, iPSC | 慢病毒 / 腺病毒 |
| 原代 / 难转染 | 原代成纤维、原代免疫细胞 | 慢病毒 / 腺病毒 |
确认编辑类型（KO / KI / 点突变 / dCas9）、靶基因与目标细胞，据此推荐递送系统与编辑技术路径。
多靶点评选并做脱靶预测，确定 Cas9 / sgRNA / donor / dCas9 效应域组合与表达骨架。
将编辑元件克隆至质粒骨架；或包装慢病毒 / 腺病毒颗粒并完成滴度测定。
质粒做测序并去内毒素；病毒完成滴度测定与无菌 / 无支原体 / 内毒素检测。
按标准规格交付质粒或病毒产品，随附使用说明、实验方案与质量报告（具体交付以合同为准）。
交付后提供转染 / 感染条件建议、MOI 参考，以及编辑效率验证的方法指导。
点击下方标签切换，查看 CRISPR/Cas9 慢病毒、腺病毒、质粒三类系统的客户应用案例。
CRISPR/Cas9 慢病毒助力 Artemisinin 改善 PCOS 机制研究
Artemisinins ameliorate polycystic ovarian syndrome by mediating LONP1-CYP11A1 interaction
CRISPR/Cas9 腺病毒助力 LINGO-1 缺陷神经组织修复脊髓损伤机制研究
The LINGO-1-deficient neural stem cell-derived neural tissueoid enhanced retention and neuronal relay in the transected spinal cord
CRISPR/Cas9 质粒助力 SCAP 降解剂 lycorine 改善代谢综合征机制研究
Discovery of a potent SCAP degrader that ameliorates HFD-induced obesity, hyperlipidemia and insulin resistance via an autophagy-independent lysosomal pathway
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