8736Discovery of a potent SCAP degrader that ameliorates HFD-induced obesity, hyperlipidemia and insulin resistance
（杂志: 中国药科大学）
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从靶点设计、递送、单克隆筛选到基因型鉴定，交付基因型明确、性状稳定的敲除细胞株
CRISPR/Cas9 通过 sgRNA 引导 Cas9 核酸酶在基因组特定位点产生双链断裂，细胞在修复过程中产生插入或缺失突变，导致基因移码与功能丧失。
本服务采用慢病毒递送 CRISPR 系统，可绕开部分细胞质粒转染效率低的问题，提高难转染细胞的编辑阳性细胞比例，为单克隆筛选提供足够的候选细胞。感染并富集后，通过有限稀释法挑取单克隆，扩增后获得基因型一致的单克隆敲除细胞株。
这是项目设计中的关键选择，直接影响后续实验的可重复性与成本。
| 对比项 | 混合克隆（Pool） | 单克隆（Monoclonal） |
|---|---|---|
| 基因型 | 多种突变型混合，群体异质 | 单细胞扩增，经鉴定后基因型一致 |
| 适用场景 | sgRNA 效率验证、早期表型筛查 | 机制研究、正式实验、长期使用 |
| 可重复性 | 批次间及传代中突变比例可能漂变 | 克隆鉴定后背景一致，重复性较好 |
| 周期与成本 | 较短、较低 | 需额外进行有限稀释、克隆扩增与鉴定 |
若仅需快速验证 sgRNA 活性或进行短期初筛，混合克隆在周期和成本上更有优势；但混合克隆中不同突变型比例可能随传代或批次变化，长期实验的可重复性有限。用于发表、机制研究或长期传代的细胞株，建议直接构建单克隆。
| 交付项 | 规格 | 说明 |
|---|---|---|
| 敲除细胞株 | 冻存管形式交付，含备份管 | 不低于5x106每管 |
| STR 鉴定报告（可选） | 1 份 | 确认细胞身份，无交叉污染 |
| T 载体测序报告 | 1 份 | 确认突变类型与等位基因编辑情况 |
| 支原体检测报告 | 1 份 | 确认无污染 |
| 培养条件说明 | 1 份 | 含培养基、传代比例与冻存复苏建议 |
| 对照细胞（可选） | 野生型或对照株 | 按项目需求确认是否包含 |
| WB 验证（可选） | 按需求 | 蛋白水平佐证，需评估抗体可用性 |
如不确定目标细胞系是否适用，可在方案阶段提供细胞系名称，我们将评估可行性与预期编辑效率。
基因功能研究：敲除候选基因，观察表型。
药物靶点验证：评估增殖、凋亡与药物敏感性。
信号通路解析：多基因敲除以考察基因家族冗余。
疾病模型构建：在疾病相关细胞系中引入敲除，结合后续组学分析。
用于研究 SCAP 在脂质代谢与自噬调控中的作用。交付单克隆敲除细胞株，附 STR 鉴定报告与 T 载体测序验证。
用于研究 RNA 甲基化修饰在肿瘤细胞中的功能。交付单克隆敲除细胞株与完整鉴定报告。
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