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细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础，是生物体的重要生命特征。细胞通常以分裂的方式进行增殖。细胞毒性（cytotoxic）是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件，不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。
CCK-8 试剂盒是一种基于 WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8 属于 MTT 的升级产品，具有灵敏度更高、操作更简便、细胞毒性更低等优势，是当前细胞活性检测领域的主流方法之一。
| 优势项目 | CCK-8法特点 |
|---|---|
| 操作简便 | 液体试剂即开即用，一步添加，无需配制、无需有机溶剂溶解 |
| 灵敏度高 | 线性范围广，检测灵敏度高，重复性好 |
| 细胞毒性低 | WST-8不进入细胞，检测完成后更换新培养液，细胞可继续用于后续实验 |
| 稳定性好 | 培养液中酚红和血清不影响检测结果 |
| 适用范围广 | 可用于大规模、高通量样品检测 |
药物筛选
细胞增殖测定
细胞毒性测定
肿瘤药敏试验
生物因子活性检测
| 货号 | 规格 | 体积 | 参考价格（元） |
|---|---|---|---|
| HB-CCK-8-50T | 50T（试用装） | 5 mL | - |
| HB-CCK-8-500T | 500T | 5 mL | ¥625 |
| HB-CCK-8-1000 | 1000T | 10 mL | ¥1,125 |
| HB-CCK-8-3000 | 3000T | 30 mL | ¥2,500 |
CCK-8细胞增殖检测试剂盒是一种基于WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的快速灵敏度试剂盒。
WST-8属于MTT的升级产品，工作原理为：在电子耦合试剂存在的情况下，WST-8可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）（图1-2），其颜色的深浅与存活细胞数目的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450 nm波长处测定OD值，可以间接反映活细胞的数量。
CCK-8法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
（1）细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液（100 μl/孔）。将培养板放在培养箱中预培养一段时间（37℃, 5% CO2）。
2、向每孔加入10 μl CCK-8溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
5、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μl 0.1 M的HCl溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。
（2）细胞增殖-毒性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液（100 μl）。将培养板放在培养箱预培养24小时（37℃，5% CO2）。
2、向培养板加入10 μl不同浓度的待测物质。
3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。
4、向每孔加入10 μl CCK-8溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。
5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
7、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μl 0.1M的HCl溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。
注：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK-8之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
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